凝血酶原时间(pt)测定
5页1、1凝血酶原时间(PT)测定(分析仪器法)某某人民医院检验科临检室凝血酶原时间(PT)测定(分析仪器法)编号:版本:1页数:共 5 页1 实验原理:凝固法确定量的血浆(50 微升)样本经一定时间加温后,加入 PT 试剂,采用波长660nm 的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,然后通过标准曲线求出凝血酶原时间,再通过参数计算得出凝血酶原活动度及 INR 值。2 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹 12 小时左右),静脉采血。2.2 3.8(w/v)枸椽酸钠 0.2ml+静脉血 1.8ml,混匀。3 标本存放1 小时内(3000r/min15min)分离血浆,室温放置不超过 2 小时,28保存不超过 4 小时,长时间保存需在冰冻条件下, (-70不超过 6 个月),只能冻融 1 次,在 37迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。4 标本运输:低温条件下运输。5 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。6. 实验材料:6.1 德国 Dade Behring Marburg 公司凝血酶原测定试剂,每瓶加 4ml
2、蒸馏水溶解(40 人份),未开封试剂 28贮存到说明书上有效期,复溶试剂 28保存不超过 5 天。6.2 Dade Control 质控血浆.用蒸馏水 1ml 溶解后放置 30 分钟,才能使用或分装。复溶后,室温保存 2 小时,284 小时。7. 仪器设备:7.1 仪器名称: Sysmex CA-1500 全自动血液凝固分析仪27.2 仪器厂家:日本 Sysmex 公司7.3 仪器型号:Sysmex CA-15007.4 仪器技术参数:7.4.1 速度: 最快检测速度 180 测试/小时,组合检测约 140 测试/小时7.4.2 试剂位:36 个,具冷藏功能。7.4.3 样本位:50 个,可自动连续添加。7.5 仪器校准程序:7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)8. 操作步骤:8.1 检查前准备:8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线)。8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。8.2 开机先开打印机再开主
3、机,开机后仪器自检,约 15 分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。8.3 输入工作清单:从主菜单选 Work List出现第一架样本工作清单输入画面,选 ID NO Entry 输入第一个样本号按相应实验项目名称键 PT,并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项(PT、APTT、Fbg、TT) ”,可按 Profile #1 组合选项选择,选中项目相应位置标记为“” ,选完项目后按 ENTER确认,要删除某项目时只需按该项目(按键如 PT 变为 PT-)即可,用键,同样输入其他标本编号项目。 (快速输入可用 Repeat 键,输入重复标本数,复制同样项目的输入。8.4 放置样本按 8.3 所设好的工作清单顺序将离心分离好的样本放置于样本架上,并按顺序把样本架排列于 Sampler 进样器右边位置(最多同时放 5 架共 50 个样本)8.5 按 Start 键开始测定.盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正上方显示“Ready”)按 Start3键,进样开始,测定进行,仪器显示为“Analying”(被选择项
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